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總RNA提取試劑盒

貨號：R2000
規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品內(nèi)容：

保存：室溫（15℃-25℃）干燥條件下可保存 12 個月，更長時間的保存可置于 2℃-8℃。

產(chǎn)品簡介：
    本試劑盒適合于從血清、細(xì)胞上清、淋巴液中提取 RNA 病毒基因組，不適合于細(xì)胞等組織內(nèi) RNA 病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組 RNA 可用于 RT-PCR 實驗。

操作步驟：
    使用前請先在漂洗液中加入一瓶新開啟的無水乙醇，加入到離瓶口約 0.5-1cm 距離，蓋好搖勻。所有離心步驟均在 2-8℃條件下進(jìn)行。
    1、 取病毒上清液 0.5ml，12000rpm 離心 5min，盡量吸盡上清使用，棄去沉淀（如無沉淀可省去此步）。
    2、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K，充分混勻，65℃消化 10min，期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。
    3、 吸附柱前處理： 從包裝中取出吸附柱， 放入收集管中， 加入 700ul 洗柱液， 室溫放置 2 分鐘， 2-8℃ 12000rpm 離心 2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中待用。
    4、 向病毒上清中加入 500ul 結(jié)合液，充分混勻。再向管中加入 400ul 無水乙醇，充分混勻，此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響 RNA 的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，靜置 2min。 （吸附柱的大容積為 750ul，可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。 ）
    5、 12000rpm 離心 2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
    6、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液( 使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
    7、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
    8、 12000rpm 離心 2min，將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR 等。
    10、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加 50ul-100ul 經(jīng) 65℃水浴預(yù)熱的 RNase freeddH2O，室溫放置 5min，12000rpm 離心 2min。即可得到高質(zhì)量的病毒基因組 RNA。

注意事項：

1、經(jīng)常更換新手套。因為皮膚經(jīng)常帶有細(xì)菌，可能導(dǎo)致 RNase 污染。使用無 RNase 的塑料制品和槍頭避免交叉污染。
2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致提取的 RNA 提取量也下降。
3、若結(jié)合液中有沉淀，可在 37℃水浴中重新溶解。
4、如果樣品消化不*，后面的離心步驟中可能會出現(xiàn)堵柱子的情況，可適當(dāng)延長離心時間。
5、洗脫緩沖液的體積好不少于 50ul，體積過小會影響回收效率。
6、RNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-70℃，以防 RNA 降解。
7、RNA 檢測：得到的基因組 RNA 片段的大小與病毒的保存條件和種類等因素有關(guān)。由于病毒不含有核糖體RNA， 所以常規(guī)電泳無法檢測， 只有后期實驗才可檢測到。 D260值為1相當(dāng)于大約40 μg/ml單鏈RNA。

總RNA提取試劑盒訂購說明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

運(yùn)輸說明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

 參考文獻(xiàn)：
《Roles of β-catenin, TCF-4, and survivin in nasopharyngeal carcinoma: correlation with clinicopathological features and prognostic significance》 作者:Pei-Ying Jin, Zi-Hui Zheng, Hong-Jie Lu, Jing Yan, Gui-Hong Zheng, Yuan-Lin Zheng, Dong-Mei Wu and Jun Lu 期刊:Cancer Cell International 影響因子:3.439 PMID:30867651